TBNK淋巴细胞亚群检测试剂盒(流式细胞仪法)
--评估免疫功能，，，辅助诊断指标
样本类型：外周血，，，骨髓，，，胸腹水，，，穿刺液，，，灌洗液，，，，脱落细胞，，，，实体组织，，，，人造微球
校准品：请根据所用流式细胞仪型号选用厂家要求配套的校准品
质控品：请根据所用流式细胞仪型号选用厂家推荐的质控品
配套仪器：中生BioCyte、、FlowCyte/ZS-AE7S、、、FACSCantoII、、、、FACSCalibur、、、、DxFLEX、、、Navioses、、、NovoCyte、、、、BriCyte E6等流式细胞仪
指标简介
淋巴细胞亚群是免疫系统中具有不同功能和表面标记的淋巴细胞类型，，，，主要包括T细胞(CD3+)、、、、B细胞(CD19+)和自然杀伤细胞(NK细胞，，，，CD16+/CD56+)。。。这些亚群通过协同作用识别并清除病原体、、、、异常细胞，，，，维持免疫平衡。。。淋巴细胞亚群分析是检测细胞免疫和体液免疫功能的重要指标，，，，总体反映机体当前的免疫功能、、、、状态和平衡水平，，并可以辅助诊断某些疾病，，如自身免疫病、、、、免疫缺陷病、、恶性肿瘤、、血液病、、、变态反应性疾病等，，分析发病机制，，，，观察疗效及检测预后有重要意义。。
检测原理
流式细胞仪法：待测样本的细胞悬液，，，，在鞘液的包围和约束下，，细胞排成单列高速由流动室喷嘴喷出，，，形成细胞液柱。。。当液柱通过检测区，，，，在入射的激光束照射下产生前向角散射光（FSC）和侧向角散射光（SSC），，它们分别反映细胞大小和颗粒度，，，根据这些特性可以将细胞分类。。。经一种或几种特殊荧光标记的样本，，在激光束的激发下所产生的特定荧光，，，可被光学系统检测并输送到计算机进行分析，，得到细胞相应的各种特性。。。。
临床应用
- 肿瘤科的临床应用：淋巴细胞亚群检测为肿瘤的诊断、、预后和治疗能够提供患者免疫功能状态，，有助于实现肿瘤治疗的个性化和精准化。。。各类型肿瘤患者CD3+、、CD4+、、、NK细胞明显降低，，，CD8+细胞明显升高, CD4+/CD8+比值显著降低，，，，表明为免疫功能处于免疫抑制状态，，识别和杀伤突变细胞的能力下降，，，形成了肿瘤的生长与转移。。。动态监测淋巴细胞亚群变化，，可评价患者的免疫功能，，，判断肿瘤预后，，，评估放化疗的疗效，，预测肿瘤转移或复发风险，，，，根据患者淋巴细胞亚群检测结果，，，，及时调整治疗方案，，，以便达到更好地治疗效果。。。(1)评估肿瘤患者整体免疫状态：一般肿瘤患者的总T淋巴细胞(CD3+)降低，，，，T抑制性淋巴细胞(CD3+CD8+)早期升高，，中晚期患者降低，，，，T辅助\诱导淋巴细胞(CD3+CD4+)降低，，，CD4/CD8 比值降低，，，NK 细胞在肿瘤的早期升高，，，，中晚期降低。。。。(2)评估预后：放化疗后，，CD3+细胞、、CD4+细胞、、CD4+/CD8+比值较治疗前升高，，，CD8+细胞较治疗前有所降低提示患者机体免疫状态好转，，，预后较好，，，，总生存率相对较高。。。。反之则预后较差，，，生命垂危时B细胞可极度降低。。。(3)预测复发或转移：当血液肿瘤患者外周血中出现 CD4+ T 和 CD8+ T细胞减少，，CD4+/CD8+比值降低，，而 Treg 细胞明显增加时，，，，提示肿瘤复发和转移的风险增加[1]。。。。
- 血液科的临床应用：研究发病机制及疾病诊断与分型：现已发现骨髓造血细胞的增殖、、分化障碍与T淋巴细胞亚群异常有关。。。再生障碍性贫血、、、粒细胞减少症、、、骨髓异常增生综合征、、血小板减少症、、、、多发性骨髓瘤患者外周血CD4+细胞减少，，，CD8+细胞增高，，，，CD4+/CD8+比值显著下降;而缺铁性贫血患者B细胞比例增高，，，，T细胞亚群均在正常范围[2, 3]。。(1)免疫功能评估：血液肿瘤会影响患者的免疫功能，，，淋巴细胞亚群检测可以评估患者的免疫状态，，，，为疾病治疗提供参考[1]。。(2)疗效监测与预后评估：通过监测治疗过程中淋巴细胞亚群的变化，，可以评估治疗效果，，并预测患者的预后。。。(3)感染风险预警：血液病患者由于免疫功能受损，，，，容易感染。。淋巴细胞亚群检测可以预警感染风险，，，，指导临床预防措施。。(4)监测免疫功能重建过程：骨髓或干细胞移植后免疫系统重建极为缓慢。。NK细胞首先升高，，，随后T、、、B细胞开始恢复。。淋巴细胞亚群检测有助于监测和评估患者的免疫重建情况，，，预防和预测移植物抗宿主病 (GVHD)[4]。。。。(5)监测排斥反应和免疫抑制治疗：CD4+/CD8+比值较移植前明显升高，，，则可能发生排斥反应。。。CD4+/CD8+比值低于0.2，，，，则停用免疫抑制剂。。。(6)动态监测与随访：建立患者个体化的淋巴细胞亚群检测基线，，动态监测其变化趋势，，为临床决策提供全面参考。。。。
- 感染科的临床应用：(1)感染性疾病的辅助诊断：淋巴细胞亚群的变化反映机体对感染的反应状态。。。。在病毒感染时，，，可能会观察到CD4+ T细胞和CD8+ T细胞的数量变化。。。。CD4+/CD8+比值倒置被认为是病毒感染性疾病的重要指征。。。。CD4+T细胞是HIV侵袭的主要细胞，，用于艾滋病辅助诊断及疾病分期、、、、评估HIV感染后免疫系统受损程度及监测用药[5]。。。(2)评估免疫状态：通过检测淋巴细胞亚群，，医生可以评估患者的免疫状态是否正常，，是否存在免疫功能低下的情况，，这对于指导感染性疾病的治疗和预防具有重要意义。。(3)监测病程和疗效：在某些慢性或复发性感染中，，，通过定期检测淋巴细胞亚群的变化，，，可以监测病程进展和治疗效果。。。。(4)指导治疗方案：淋巴细胞亚群检测结果有助于医生制定或调整治疗方案，，尤其是在免疫缺陷患者中，，，可能需要采取特殊的治疗措施。。。。(5)识别重症风险：在新冠感染等情况下，，，TBNK淋巴细胞计数的进行性减低可能提示重症或危重症风险，，，，有助于高效识别重症和危重症患者。。(6)免疫缺陷的识别：淋巴细胞亚群检测有助于识别原发性或继发性免疫缺陷病，，，，如某些遗传性免疫缺陷或由于其他疾病导致的免疫功能障碍。。。。
- 风湿免疫科的临床应用：(1)辅助诊断：通过分析淋巴细胞亚群的水平，，，帮助诊断某些自身免疫性疾病，，，，如类风湿性关节炎、、系统性红斑狼疮等。。。。干燥综合征(SS)以B细胞显著升高为主要特征。。。(2)监测疾病活动性：淋巴细胞亚群的变化可以反映疾病的活动性，，，，对病程监测有重要意义。。(3)指导治疗：检测结果有助于医生评估免疫抑制剂治疗的效果，，，，指导免疫抑制剂的选择和剂量调整。。。(4)预测疾病预后及感染风险评估：某些淋巴细胞亚群的数量变化可能与疾病的严重程度和预后有关，，如CD4+ T细胞数量的减少可能提示感染风险。。
- 儿科的临床应用：许多疾病涉及儿童相应免疫功能异常，，，流式细胞仪检测淋巴细胞亚群已较为广泛的应用于儿科临床，，，，对疾病的诊断、、治疗具有重要作用。。但是淋巴细胞亚群在不同年龄阶段有不同的正常参考范围，，，并且其结果受多种因素的影响，，，造成临床判读相对困难。。为科学合理应用FCM协助诊治儿科疾病，，，我国先后发布过《流式细胞术检测T、、、、B、、、、NK细胞儿科临床ABC手册》(2016)[6]、、《流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识》(2016版及2019版)[7]，，，用于指导淋巴细胞亚群检测在儿科的应用。。。。
- ICU 的临床应用：重症患者涉及多个专科范畴，，，，患者机体免疫功能低下，，抗生素使用量大，，使大量非致病菌或条件致病菌繁殖，，，转化为致病菌或菌群异位，，，造成感染。。另外，，患者由于自身免疫力低，，，，容易发生继发感染，，，，此类感染性并发症常导致病情迅速恶化。。。因此在治疗前检测 T 淋巴细胞亚群可以了解患者免疫功能水平，，，确定治疗药物，，，评估治疗风险，，判断预后;治疗中可定期监测，，，，实时掌握患者治疗情况，，及时调整治疗方案;重症情况好转后需持续监测淋巴细胞水平，，，，若出现免疫功能持续低下，，，，则可能出现恶化。。。
- 妇产科/生殖科的临床应用：人体免疫功能紊乱是妇科肿瘤、、盆腔炎等炎症性疾病、、、妊高征、、、、反复自发性流产、、子宫内膜异位症等疾病的发生发展的重要原因之一，，，，因此，，进行淋巴细胞亚群检测，，，对于评估患者免疫功能状态，，，辅助判断病情及监测疾病进展，，，，判断预后，，评价治疗效果有重要意义。。。。
- 呼吸科的临床应用：肺炎患者存在 B 淋巴细胞活化增强、、、体液免疫功能亢进、、细胞免疫功能抑制，，，常表现为 CD3、、、、CD4、、、CD4/CD8 降低，，，，重症肺炎患者 CD4数值表现更低下。。治疗期间防治感染更为关键，，，，若出现继发感染使免疫功能再次损伤，，不利于疾病恢复。。。。此类患者将淋巴细胞亚群计数作为疾病病情的辅助评判指标。。。
- 外科的临床应用：术后感染:淋巴细胞亚群降低是老年患者术后感染的一个重要危险指标。。。术后发生肺部感染和尿路感染的老年患者，，，常表现为 CD4 细胞、、CD8 细胞绝对计数降低，，，提示感染的发生与患者免疫功能低下相关。。。
- 皮肤性病科的临床应用：皮肤是具有免疫功能并与全身免疫系统密切相关的外周淋巴器官。。淋巴细胞中只有T细胞能进入皮肤器官，，，T 细胞产生免疫应答一方面杀伤靶细胞及肿瘤细胞，，另一方面也会引起组织损伤。。。。
- 老年科的临床应用：人随着年龄的增大，，，由中年迈入老年，，，，其免疫系统发生一系列变化，，，主要表现为免疫细胞尤其是淋巴细胞亚群数量降低，，，细胞间调节失衡，，，，免疫反应能力降低。。。
- 五官科/口腔科的临床应用：牙周炎的发生、、发展和转归是牙周致病菌和宿主免疫防御机制相互作用的结果，，，患者普遍存在外周血淋巴细胞数量降低和比例紊乱。。。体内淋巴细胞亚群的降低可刺激 B 细胞分泌活跃，，，产生 IgG 形成免疫复合物，，进而激活补体，，诱发免疫复合物黏附和沉积，，，，使患者发病。。。通过淋巴细胞亚群的检测，，，，可以了解患者的免疫状态，，判断疾病的发展情况和预后。。
- 新生儿科的临床应用：小儿出生时期，，，，免疫器官和免疫细胞已经发育成熟，，，，但因免疫系统"无经验"之故，，未曾接触过抗原，，，，故未能建立免疫记忆反应，，，各项免疫指标变化尤其需要引起重视和关注。。。。
适用科室
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适用科室 |
疾病 |
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儿科 |
反复呼吸道感染、、、肺炎、、、原发性免疫缺陷病（PID）、、、再生障碍性贫血、、、、传染性单核细胞增多症、、、、反复腹泻、、、、病毒性黄疸等 |
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呼吸科 |
肺炎、、慢性阻塞性肺疾病、、、支气管哮喘、、呼吸衰竭、、肺结核、、间质性肺病、、、、呼吸系统肿瘤、、、、反复呼吸道感染、、、、激素治疗等 |
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血液科 |
弥漫大 B 细胞淋巴瘤、、难治性淋巴瘤、、、慢性淋巴细胞白血病、、再生障碍性贫血、、、粒细胞减少症伴血小板减少、、、异基因外周血干细胞移植等 |
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肿瘤科 |
各种实体肿瘤，，，各种血液肿瘤 |
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风湿免疫科 |
类风湿性关节炎、、系统性红斑狼疮、、、、干燥综合征等 |
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外科 |
术后感染、、恶性肿瘤、、、热烧伤、、危重急腹症、、多发性创伤、、、 |
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器官移植科 |
包括造血干细胞移植以及各种器官移植 |
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皮肤性病科 |
带状疱疹、、、荨麻疹、、寻常疣/扁平疣/尖锐湿疣、、白癜风、、 银屑病、、、斑秃、、、梅毒等 |
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妇产科 |
复发性流产、、、、不孕、、、妊娠、、、妇科肿瘤、、、妇科炎症等 |
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ICU |
多器官功能障碍综合征、、、、肾移植术后巨细胞病毒感染、、脓毒症、、、、严重肝病并发感染性休克等 |
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内分泌科 |
糖尿病，，，，自身免疫性甲状腺疾病包括Graves病（弥漫性毒性甲状腺肿）和Hashimoto甲状腺炎（慢性淋巴细胞性甲状腺炎），，多内分泌腺病综合征，，，肾上腺皮质功能减退症（艾迪森病），，，，某些内分泌肿瘤如垂体腺瘤或甲状腺癌等 |
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肾内科 |
肾病综合征、、、、肾功能不全等 |
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感染科 |
反复或严重感染、、、、原发性免疫缺陷病、、艾滋病和特发性 CD4+T 细胞减少症、、慢性乙肝肝炎患者、、甲型 H1N1 流感、、、、肺结核、、、手足口病、、、重症肺炎等 |
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老年科 |
心力衰竭、、、、帕金森、、、、阿尔兹海默症、、卒中等 |
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五官科/口腔科 |
牙周病、、复发性口腔溃疡、、、、口腔颌面部肿瘤、、、单纯疱疹病毒性角膜炎、、、闭角型青光眼、、、、分泌性中耳炎、、、变应性鼻炎等 |
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新生儿科 |
感染性肺炎、、、、新生儿黄疸、、、窒息早产儿、、宫内感染乙型肝炎、、、缺氧缺血性脑病等 |
参考文献
[1] 中国医药质量管理协会医学检验质量管理专业委员会, et al., 淋巴细胞亚群检测在血液肿瘤中应用的专家共识. 2023. 44(15): p. 1793-1802.
[2] 杜蓉 and 郭静明, 淋巴细胞亚群在血液病中的研究进展 %J 世界最新医学信息文摘(连续型电子期刊). 2019. 19(99): p. 122,124.
[3] 阎影, et al., 淋巴细胞亚群在几种血液病中的分布特点 %J 中华血液学杂志. 1988(05): p. 275-277.
[4] 王雯娟, et al., 供者干细胞淋巴细胞亚群检测对异基因造血干细胞移植后免疫排斥反应及免疫重建的临床意义. 2023(03): p. 170-174.
[5] 荆凡辉, 吕玮, and 李.J. 中国艾滋病性病, HIV感染者免疫功能重建新视角:CD4/CD8比值. 2018. 24(6): p. 4.
[6] 沈立松, 无.A.王.A., 流式细胞术检测T、、B、、、NK细胞儿科临床ABC手册 %J 临床儿科杂志. 2016. 35(5).
[7] 中国儿童免疫与健康联盟免疫评估工作组, et al., 流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识(2019版). 2019. 57(6): p. 5.
指南共识
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序号 |
指南/共识名称 |
要点 |
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1 |
中华医学会健康管理学分会 《TBNK淋巴细胞检测在健康管理中的应用专家共识》（2023）[1] |
目前，，TBNK淋巴细胞检测已全面应用于艾滋病、、严重急性呼吸综合征(SARS)、、、、慢性乙型肝炎、、、、手足口病、、Epstein-Bar病毒(EBV)感染、、、、流行性出血热等多种感染性疾病患者的免疫评估及诊治，，，也逐渐成为自身免疫病、、肿瘤、、、、器官移植、、血液系统疾病、、重症监护医疗、、、、老年医学及保健等学科的免疫监测辅助工具。。。 |
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2 |
中国医师协会儿科医师分会风湿免疫专委会、、、、中国医师协会儿科医师分会过敏专委会、、、中华医学会儿科分会免疫学组、、中华医学会检验医学分会、、中华检验医学杂志编辑委员会、、、临床儿科杂志编辑委员会 《流式细胞术检测T、、、B、、NK细胞儿科临床ABC手册》（2016）[3] |
流式细胞仪检测淋巴细胞亚群已较为广泛的应用于儿科临床。。 |
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3 |
中国医药质量管理协会医学检验质量管理专业委员会 《淋巴细胞亚群检测在血液肿瘤中应用的专家共识》（2023）[5] |
淋巴细胞亚群中的T淋巴细胞、、B淋巴细胞、、自然杀伤淋巴细胞及淋巴细胞功能亚群调节性T细胞是细胞免疫检测的常用指标，，，，广泛用于血液肿瘤患者的免疫状态评估、、、疾病复发或转移风险预测及治疗指导等。。。 |
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4 |
中国医师协会检验医师分会、、北京医师协会医学检验专科医师（技师）分会、、国家癌症中心、、、、国家肿瘤区域医疗中心、、、国家医学检验临床医学研究中心（中国医科大学附属第一医院） 《实体肿瘤外周血细胞免疫功能实验室检测专家共识》（2023）[6] |
鉴于细胞免疫功能在实体肿瘤免疫治疗中的重要价值，，，，共识编写工作组关注细胞免疫应答从启动到发挥效应功能的全过程，，，，针对参与细胞免疫应答的效应细胞、、、辅助细胞、、、、负向免疫调节细胞等多种细胞亚群和免疫分子进行了临床研究证据的整合，，，筛选出在肿瘤免疫治疗监测、、、、预后评估中具有指导价值的外周血细胞免疫功能实验室指标，，，，并结合临床检验实践归纳为T淋巴细胞亚群精细分型，，髓源性抑制细胞（MDSC)亚群分析和细胞因子水平检测三大类，，，，并对这些指标的检测方案和临床应用选择作出了推荐。。。 |
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5 |
中国儿童免疫与健康联盟免疫评估工作组、、中国医师协会儿科医师分会风湿免疫专委会、、中国医师协会儿科医师分会儿童过敏专委会、、、、中华医学会儿科学分会免疫学组 《流式细胞术分析外周血淋巴细胞亚群在儿科的临床应用专家共识 (2019版)》（2016年首次发表）[13] |
淋巴细胞亚群分析是临床开展最多的FCM检测项目。。 |
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6 |
国家医学检验临床医学研究中心（中国医科大学附属第一医院）、、中华医学会检验医学分会、、国家卫生健康委临床检验中心、、、中华检验医学杂志编委会 《流式细胞术的临床应用专家共识》（2023）[24] |
淋巴细胞亚群分析是目前流式细胞术临床应用范围最广泛的项目。。 |
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7 |
中国中西医结合学会检验医学专业委员会 《基于多参数流式细胞术精细化分析外周血免疫细胞亚群的中国专家共识》（2023）[25] |
对于“淋巴细胞亚群检测的定义及内涵”，，，，建议由原来的总T、、B、、、、NK、、、CD4+T、、CD8+T细胞组成的简单亚群，，，，增加分化发育、、、功能性和活化状态相关标志物，，，，并更改为“精细化分析免疫细胞亚群”。。 |
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8 |
中华医学会感染病学分会艾滋病丙型肝炎学组，，，中国疾病预防控制中心《中国艾滋病诊疗指南（2021年版）》（2005年首次发表）[26] |
HIV/AIDS患者的实验室检查主要包括HIV抗体检测、、HIV核酸定性和定量检测、、CD4+T淋巴细胞计数、、、、HIV耐药检测等。。。。HIV核酸定量和CD4+T淋巴细胞计数是判断疾病进展、、、、临床用药、、、疗效和预后的两项重要指标。。。。 |
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9 |
《中国防痨杂志》编辑委员会，，，，中国医疗保健国际交流促进会结核病防治分会基础专业和临床专业学术部 《结核病患者外周血淋巴细胞亚群检测及临床应用专家共识》（2020）[27] |
通过流式细胞术(FCM)分析患者外周血淋巴细胞亚群是目前临床评估免疫功能的方法之一，，有助于了解患者当前的免疫状态、、、、免疫功能和免疫平衡，，，，为临床制定免疫干预措施、、、、观察疗效及判断预后等方面提供实验室检测依据。。。。 |
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10 |
中华医学会健康管理学分会、、《中华健康管理学杂志》编委会 《新型冠状病毒感染康复期人群健康体检特殊项目的专家共识》 |
结合“阳康”人群的特点和新冠病毒对健康的潜在影响，，，同时兼顾卫生经济学价值，，我们对不同体检机构已经展开的项目做出如下建议：7.免疫球蛋白及补体检测、、、淋巴细胞亚群分析。。淋巴细胞亚群分析反映机体的细胞免疫水平。。。 |
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11 |
中华医学会感染病学分会艾滋病丙肝学组 《艾滋病免疫重建不全临床诊疗专家共识(2023版)》 |
CD4+T淋巴细胞(以下简称CD4T细胞)是HIV感染最主要的靶细胞，，，HIV感染人体后，，出现CD4+T细胞进行性减少，，细胞免疫功能受损。。进入ART时代后，，，大部分患者经过有效的ART后，，病毒载量 (viral load,VL)低于检测下限，，显著降低HIV感染者的艾滋病发病率和病死率。。 |
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12 |
中华医学会呼吸病学分会危重症学组、、中国医师协会呼吸医师分会危重症医学专家组 《奥密克戎变异株所致重症新型冠状病毒感染临床救治专家推荐意见》（2023） |
重症COVID-19患者的炎症反应及相关指标：免疫反应失衡指标。。①淋巴细胞绝对值。。 |
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13 |
中国疾病预防控制中心 《全国艾滋病检测技术规范（2020年修订版）》 |
CD4+和 CD8+T淋巴细胞检测的意义：HIV 感染免疫状态和临床分期；疾病进展监测；机会性感染的风险评估；抗病毒治疗适应症选择及疗效评价；免疫重建监测。。。 |
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14 |
国家卫生健康委员会 《流式细胞术检测外周血淋巴细胞亚群指南》（2024版）（2011年首次发布） |
外周血淋巴细胞亚群是监测机体免疫功能的重要指标，，，，主要用于免疫系统疾病及免疫相关疾病诊断和治疗的临床监测。。T细胞亚群与细胞免疫功能有关，，，，B细胞与体液免疫功能有关，，NK细胞与非特异免疫功能有关。。。 |
